慢病毒載體
概述
慢病毒載體系統(tǒng)是一種能非常高效的把外源基因穩(wěn)定整合到哺乳動物細胞中的載體工具。除了常規(guī)質粒轉染外，目前該系統(tǒng)也是把外源基因轉入哺乳動物細胞的最常用方法之一。由于具有目的基因和啟動子選擇的靈活性以及轉染細胞類型的廣泛性兩大特點，使得慢病毒載體系統(tǒng)成為倍受歡迎的外源基因表達系統(tǒng)。
慢病毒載體來源于人類免疫缺陷病毒HIV，屬于逆轉錄病毒家族。野生型慢病毒基因組是線性雙正鏈RNA。
慢病毒重組載體構建完成后與輔助質粒一起轉染進入包裝細胞。在包裝細胞中，位于兩個長末端重復序列（LTR）之間的DNA片段會被轉錄成RNA，由輔助質粒表達的病毒蛋白將其包裝形成病毒顆粒。包裝后的活體病毒將會被釋放到上清液中，可以直接收集或進一步濃縮病毒轉染靶細胞。
當病毒轉導靶細胞時，釋放到宿主細胞中的病毒RNA借助逆轉錄酶逆轉錄成雙鏈DNA，然后隨機整合進宿主細胞的基因組中。在病毒載體中，位于兩個LTR的DNA片段和病毒基因組都會穩(wěn)定整合到靶細胞的基因組中。
關于慢病毒基因表達載體的更多信息，請參考以下文獻。
| 參考文獻 | 主題 |
|---|---|
| J Virol. 72:8463 (1998) | The 3rd generation lentivirus vectors |
| J Virol. 72:9873 (1998) | Self-inactivating lentivirus vectors |
| Science. 272:263 (1996) | Transduction of non-dividing cells by lentivirus vectors |
| Curr Gene Ther. 5:387 (2005) | Tropism of lentiviral vectors |
| J Virol. 77:4685 (2003) | Impact of cPPT to lentivirus vector transduction |
| J Virol. 73:2886 (1999) | WPRE enhances the expression of transgenes |
| Nat Protoc. 1:241 (2006) | Production and purification of lentiviral vectors |
